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帕瑞昔布钠对大鼠离体精子运动、体外获能、顶体反应与其机制的分析.pdf 32页

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温州医科大学硕士学位论文 帕瑞昔布钠对大鼠离体精子运动、体外获能、顶体反应及其 机制的研究 中文摘要 目的 随着新型非甾体类抗炎药在临床的广泛应用,其生殖毒性越来越引起人们的 广泛关注。本实验旨在探讨非甾体类抗炎药帕瑞昔布钠对大鼠离体精子运动、获 能和顶体反应的影响,并对其机制进行研究。 方法 1.成年雄性SD大鼠24只,用颈椎脱臼法处死,取其附睾精子,分离纯化 后制成精子悬液。 2.用WesternBlot方法检i9]IJCOX-2蛋白在精子上的表达。 (P500),1000uM组(P1000),每组重复6次。 4.在37"C孵箱中分别暴露于不同浓度的帕瑞昔布钠5h。 5.采用计算机辅助精子分析系统(CASA)对精子的运动功能进行评价,包 括精子运动活力[(种b)%],平均速度(VAP)、直线速度(VSL)、曲线速 度(VCL)和侧摆幅度(ALH)。 6.采用金霉素(CTC)荧光染色法评价精子获能,其中“F”型为未获能精子, “B”型为获能精子,‘'AR”型为项体反应精子。以[(B+AR)%】表示已发生 获能的精子。 7.经过5h培养已经充分获能的精子标本,加入100uM帕瑞昔布钠lh,采用 考马斯亮蓝法评价帕瑞昔布钠对精子顶体反应的影响。 8.用ELISA方法检测精子和培养基中PGE2,PGF2。的变化。 结果 1.COX-2在大鼠精子上存在表达。 剂量依赖性的显著降低fJP<0.05)。 ) 万方数据 温州医科大学硕士学位论文 度随加入浓度增加而增高。 4.P100组顶体反应与对照组无显著性差异。 5.P100组精子获能培养5h后,精子中PGE2,PGF2。浓度降低,培养基中PGE2, PGF2。浓度升高。 结论 大鼠精子上存在COX.2蛋白的表达:在急性暴露的条件下,帕瑞昔布钠抑制 SD大鼠精子运动功能和体外获能,且随着暴露浓度的增加,抑制作用增强;而 对顶体反应没有影响;帕瑞昔布钠可以降低精子获能过程中PGE2,PGF2。的含量。 此发现对指导有生育要求的男性患者的临床用药有一定意义。 【关键词】帕瑞昔布钠;精子运动活力;获能;顶体反应 万方数据 温州医科大学硕士学位论文 ——————————————————————————————————一一一 Effects OiltheSD rat ofparecoxib sperm andacrosome reactionin vitro objective With thenew non—steroidal were usedin anti—inflammatorydrugswidely clinical male practice,their wasconcerned reproductive

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